分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,它是一種使用率很高的實(shí)驗室儀器。常用于核算、蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。在印染方面,我們可以用分光光度計測量染色時(shí)燃料的上染百分率,以及整理在織的衣物上助劑的濃度,還可以用于顏色的測量。同時(shí)它還廣泛的應用于食品檢測、農藥的檢測以及工業(yè)上石油的檢測等,紫外可見(jiàn)光光分度在實(shí)驗室中的應用非常廣泛。
分光光度計的組成
各種型號的可見(jiàn)分光光度計,就其基本結構來(lái)說(shuō),都是由五個(gè)部分組成的,即光源、單色器、洗手池、檢測器以及信號指示系統。如圖所示:
光源→單色器→吸收池→檢測器→信號顯示系統
分光光度計的基本原理
基于物質(zhì)對不同波長(cháng)的光的選擇性吸收,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光譜,當光經(jīng)色散后的光譜通過(guò)某一溶液時(shí),其中某些波長(cháng)的光就會(huì )被溶液吸收。根據朗伯-比爾定律,當一束平行單色光照射到一定濃度的均勻溶液時(shí),光強的減小程度和入射光的強度,溶液的濃度以及所透過(guò)溶液的長(cháng)度成正比,其公式為:T=I/I0A=LogI0/I=Kbc
其中:T:透色比I0:入射光強A:吸光度I:頭色光強度K:吸收系數,1/mol/comb:液層厚,cmC:溶液的濃度,mol/l
光的吸收定律的使用范圍
光的吸收定律不僅適用于有色溶液,也適用于無(wú)色溶液及氣體和固體的非散射均勻體系,不僅適用于可見(jiàn)光的單色光,也適用于紫外和紅外光區的單色光,但應注意,此定律僅適用于單色光和一定范圍的低濃度溶液。溶液濃度過(guò)大時(shí),透光性質(zhì)發(fā)生變化,從容使溶液對光的吸收度與溶液濃度不成正比關(guān)系,波長(cháng)交寬的混合光影響光的互補吸收,也會(huì )使測定產(chǎn)生誤差。 |